二十里店镇，隶属于新疆维吾尔自治区昌吉回族自治州呼图壁县，地处县境中东部，东接昌吉市榆树沟镇，南与石梯子哈萨克民族乡接壤，西与园户村镇、呼图壁镇、种牛场相连，北与兵团农六师105团交界。 区域面积310.97平方千米。2018年，户籍人口15642人。 1950年，属二区。1958年，为跃进公社。1978年，更名为二十里店公社。1984年，设二十里店乡。1996年，撤乡建镇。 2019年10月，二十里店镇下辖1个社区、8个行政村。 2018年，二十里店镇有8家工业企业，营业面积超过50平方米以上的综合商店或超市2个。 二十里店镇其下属村有： 二十里店镇社区、 宁州户村委会、 小土古里村委会、 东滩村委会、 十四户村委会、 良种场村委会、 林场村委会、 四工村委会、 二十里店村委会 共9个行政村。